Célula X•||

 ntegración de la secreción de insulina de los islotes

organoides de los islotes en la prueba de la glucosa

Por último, detectamos la secreción de insulina en respuesta a la glucosa

de los organoides de los islotes desarrollados en los andamios C-M. Las células

de células recogidas en la fase IV se expusieron a 5,5, 15 y 25 mM de glucosa, respectivamente.

25 mM de glucosa, respectivamente. Se observó un fuerte aumento

en la secreción de insulina de los grupos celulares cuando se expusieron a una

alta concentración de glucosa (Fig. 6C). Detectamos la se-

de 44 - 4,9 mIU (unidad internacional) de insulina/mg de proteínas celulares

proteínas celulares de las agrupaciones celulares inducidas en 3D cuando se expusieron a 25 mM

de glucosa. Esto representa un aumento de siete veces en la secreción de insulina, en comparación con lo que se había observado en el caso de la glucosa.

de insulina, en comparación con lo detectado en las células expuestas a

una baja concentración de glucosa (5,5 mM). Por el contrario, las células secretoras de insulina 2D-

de insulina en 2D son menos sensibles al desafío de la glucosa.

a la glucosa. Sólo se detectó una secreción de 10,8 - 3,2 mIU de insulina/mg de proteína celular

cuando las células inducidas en 2D fueron expuestas a 25 mM de glucosa.

de 25 mM de glucosa, lo que representa un aumento de 3,7 veces en la

de la secreción de insulina, en comparación con la detectada en las células

expuestas a una baja concentración de glucosa (5,5 mM). Estos resultados de

resultados demostraron que las células secretoras de insulina inducidas por 3D

de insulina inducidas en 3D son más sensibles a la glucosa debido a su elevada madurez.

elevada madurez.

Discusión

El estudio de la diferenciación pancreática de las células madre embrionarias se ha

se ha centrado principalmente en imitar la secuencia de eventos de señalización

que subyacen al compromiso celular y a la formación de tejidos durante la pancreatogénesis.

pancreatogénesis. Aparte de los factores de crecimiento solubles que son

de crecimiento solubles, que son las claves de la especificación del linaje celular, la importancia de la ECM

en la diferenciación pancreática de las células madre embrionarias y en el desarrollo de los islotes.

no se ha dilucidado del todo. En este estudio, hemos demostrado la

de generar organoides de islotes a partir de células madre embrionarias

utilizando un andamio de MEC biomimética. Investigamos los efectos combinados

efectos combinados de las señales fisiológicas y la ILV ofrecida por los andamios de colágeno y Matrigel.

colágeno y Matrigel en la generación de organoides de islotes

de islotes a partir de hESCs. Como se ha demostrado anteriormente [13,28], los andamios de colágeno I

de colágeno I ofrecen mejores nichos para promover la diferenciación

de las células endocrinas pancreáticas derivadas de mESCs.

b del páncreas. Sin embargo, un andamio de colágeno no es lo suficientemente fuerte para

para apoyar la diferenciación pancreática de las células madre embrionarias. Estos andamios

colapsan durante la diferenciación. La adición de Matrigel a los

de colágeno parece mejorar la resistencia mecánica de los andamios.

mecánica de los andamios. Aunque no medimos el módulo de Young

de Young de estos andamios, se ha descubierto que los módulos de

módulo de Young de los andamios de colágeno y Matrigel es proporcional a la concentración de Matrigel.

proporcional a la concentración de Matrigel incorporada [29].

Así, especulamos que la adición de Matrigel a un andamio de colágeno

de colágeno mejora su resistencia mecánica, lo que

de los organoides de los islotes a partir de células madre embrionarias. La adición de Matrigel a

La adición de Matrigel no sólo mejora la resistencia mecánica

mecánica de los andamios, sino que también afecta a la estructura fibrilar de los

de los andamios. El análisis SEM sugirió que

Investigacion by STBNcorp